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    PCR实验室-广东康合实验技术有限公司

    2018-08-27 09:03 来源:未知  

           分子生物学在目前医学研究领域算是前沿科技,而PCR检测技术是其中之一,在临床医学应用比较广泛。pcr检测技术主要用于对基因序列的分析,检测肿瘤、癌细胞和遗传病等发生过程,它可以在短时间之内检测到突变基因,对于复杂的基因组织也有迹可循,而且易于和其它基因检测手段结合使用,所以在医学研究应用领域受到广泛应用。这些实验都需要在特定的实验室进行,就是本文所讲的PCR实验室,如果你有PCR实验室项目,欢迎咨询康合公司,行业知名专家和您面对面沟通。
           1.什么是pcr实验室
           2.PCR实验室设计依据
           3.PCR实验室布局及主要设备
           4.PCR实验室规划设计要点
           5.PCR实验室通风系统及压差控制
           6.PCR实验室污染的预防和控制
     

    一、什么是PCR实验室
           PCR实验室另一个专业名称是基因扩增实验室。聚合酶链式反应((Polymerase Chain Reaction)的简称就是PCR,它是一种分子生物学技术,可以将特定的DNA片段放大,可看成生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,快速掌握患者体内的病毒含量,其精准程度达到纳米级别。
           PCR应用在生物学各个领域,如检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病,癌基因的检测和诊断,DNA指纹、个体识别、亲子鉴别及法医物证,动、植物检疫,动物及其衍生产品检测,转基因作物与转基因微生物检测等;举个通俗易懂的例子,通过PCR技术可以精确检测乙肝病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否要服药、肝功能有否异常改变能及时判断病人最适合使用哪类抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的检验依据。

    PCR实验室设计公司
     
    二、PCR实验室设计依据
           《医疗机构临床基因扩增管理法》(卫办医政发2010-194号)
           《生物安全实验室建筑技术规范》GB50346-2004
           《洁净厂房设计规范》GB50073-2001
           《高效空气过滤器》GB13554-92
           《实验室生物安全通用要求》GB19489-2004
           《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》WS233-2002中华人民共和国卫生部
    PCR实验室
    三、PCR实验室平面布局
           PCR实验室原则上需要分为四个区域,进入各工作区一定按照单一方向进行,而且不同的区域要穿不同的工作服,比如不同颜色。谨记:工作人员离开各工作区域时,不能将工作服带出。各工作区域必须有明确的标记,避免不同工作区域内设备、物品混用。
           PCR实验室四个区域、功能及配备设备分别为:
           1.试剂配制区
           功能:扩增试剂的配置、分装和保存;
           设备:主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平和离心机等,加样器、天平除了要专用外,还应有定期校准。试剂分装应在超净台中进行扩增反应混合液应使用分子生物学级的,试剂制备好后应有质检:一是否有污染、二是检测试剂的扩增效果。
           2.样品处理区
           功能:样本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。
           设备:生物安全柜、加样器、离心机、温育仪、混匀器等
           3.核酸扩增区
           功能:DNA扩增; 已制备的DNA模板 (来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。
           设备:核酸扩增仪、超净台、微量加样器、离心机、可移动紫外灯。扩增仪需进行校准。并配备UPS电源,以防止由于电压的波动,停电对扩增效果的影响。
           4.产物分析区
           功能:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。
           设备:酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等洁净实验区的缓冲间部分面积不能超过主实验室的八分之一,这是有规定的。
    pcr实验室平面图
           PCR实验室平面布局图
           如果使用全自动分析仪,区域可以适当合并。
           扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间最好有一定的间隔。使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。
           如果满足下列要求,则样品处理区和试剂配制区可设在同一房间内:
           1.在生物安全柜内操作;
           2.每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材;
           3.盛放污染材料的器皿密封并一次性使用;
           4.用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。
    PCR实验室走廊
     
    四、PCR实验室规划设计要点
           1、主体结构
           实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
           2、标准的三区分隔和气压调节
           将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区,同时各区通过气压调节,使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。
           可打开缓冲区Ⅰ,缓冲区Ⅱ和PCR扩增区的排风扇往外排气,在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口,空气通过回风口向室内换气。
           3、消毒
           在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯,供消毒用。
           在试剂准备区和标本制备区还设置移动紫外线灯,对实验桌进行局部消毒。
           4、机械连锁不锈钢传递窗:试剂和标本通过机械连锁不锈钢(不建议使用电子连锁方式)传递窗传递,保证试剂和标本在传递过程中不受污染(人物分流)。
           5、地面
           地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面,整体性好。便于进行清扫,耐腐蚀。没有条件的也可采用水磨石地面,或大块的瓷砖(至少800mm×800mm)接缝需要小于2mm。地面要防滑,不得铺地毯;  
           6、照明灯具要选用净化灯具,能达到便于清洗、不积尘的特点。
    PCR实验室
      
           在建设设计的过程中应注意:
           (1)可共用的建筑物,应自成一区,宜设在一侧,与建筑物其他部分可以相通。将实验室分为三区,半污染区、污染区和洁净区;
           (2)实验区应设置有非手动洗手池;
           (3)实验室的门应带锁,可自动关闭,门要带有可视窗;
           (4)实验室工作区外应有存放个人衣物的条件;
           (5)实验室内配置生物安全柜;
           (6)实验室应设洗眼设备,必要时有紧急喷淋装置;
           (7)有可靠的应急照明;
           (8)实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识
           (9)安装前需要确定以下条件,如:电源电压,电源进线位置,电话网络线进线位置,进水水压,最小安装空间,地面平整度,通风孔、进水管和下水管的位置等,理想状态的空间尺寸和通风口尺寸。
       
            总之,一定要严格遵守科学规范的流程进行安装建设
    PCR实验室
     
    五、PCR实验室通风系统及压差控制
           对于PCR实验室而言,净化要求并不严格。但是为了避免实验室各区交叉污染,需要采用全送全排的气流组织形式,而且一定要严格控制送、排风的比例,达到各实验室的压力要求。下面来看看各个分区对压力的要求
           1.试剂配制区 :本区对气流压力的控制没有严格的要求。
           2.样品处理区:本区的要求为相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。
           3.核酸扩增区:本区相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少不必要的走动。加样等操作应在超净台内进行。
           4.产物分析区:本区是最主要的扩增产物污染来源,本区相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。
    PCR实验室
     
    六、PCR实验室污染的预防和控制
           如何避免污染是PCR实验室设计的核心问题。常见的污染类型主要有以下几种类型:
           扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。
           一旦发生污染,实验就必须停止,直到找到污染源为止,而且必须作废实验结果,需要重新进行实验。这时候寻找污染源耗时繁琐,浪费人力物力。因此避免污染,首要的是预防,而不是排除。
           如何严格管理PCR实验室呢,必须注意以下几点:
           (1)严格控制进出实验室的人员。与实验无关的人员不得随意进出实验室,有条件的情况下要设置独立的通道和进出整个实验区的门;
           (2)减少实验区内不必要的走动,进而降低交叉污染的可能性。
           (3)扩增产物分析区是最主要的扩增产物污染来源,一定不能在实验室中倾倒废液,必须经消毒液浸泡消毒后在远离pcr实验室的地方弃掉,用过的一次性材料如吸头等也必须经消毒液浸泡消毒后统一处理,如焚烧等;
           (4)扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质,一定要对实验人员进行特殊的安全防护。
    PCR实验室工作人员
     
           广州康合实验设备有限公司从以上六个方面详细介绍了PCR实验室;康合是国内专业的PCR实验室设计公司,如果您需要PCR实验室装修设计或者是新建PCR实验室,亦或对PCR实验室有任何疑问,欢迎咨询康合,我们会有专业的技术人员和您面对面沟通。

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